盐酸替罗非班化学名为N-（丁基磺酰基）-O-[4-（4-哌啶基）丁基]-L-酪氨酸盐酸盐，主要与肝素联用，治疗不稳定型心绞痛或非Q波心肌梗死患者。盐酸替罗非班是一种非肽类的血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体的可逆性拮抗剂，通过阻止纤维蛋白原与糖蛋白Ⅱb/Ⅲa结合，因而阻断血小板的交联及血小板的聚集，防止血栓形成，达到治疗的目的[1]。
[摘要]目的建立盐酸替罗非班中残留溶剂的分离测定方法。方法采用气相色谱法，AgilentDB-624柱（30m×0.32mm，1.80μm），氢火焰离子化检测器，以氮气为载气，进样口温度为200℃，检测器温度为300℃；起始温度为40℃，保持20min，以每分钟20℃的速率升温至220℃，保持10min。结果被测溶剂均能得到良好的分离，每个溶剂的峰面积与浓度在一定的范围内能够呈现良好的线性关系。结论该方法能够准确测定盐酸替罗非班中的残留溶剂，可用于盐酸替罗非班原料药有机溶剂的检测。
[关键词]中国全科医学杂志,气相色谱法,盐酸替罗非班,残留溶剂
药品的残留溶剂指在原料药、辅料以及制剂生产中使用的，但在生产工艺过程中未能完全去除的有机挥发性化合物[2-3]。残留溶剂对人体具有毒性和致癌作用，因此需要进行残留溶剂检查。残留溶剂测定是原料药检查的一项重要内容，在《中华人民共和国药典》（简称“中国药典”）[4]及《药品注册的国际技术要求》（ICH）[5]中均有明确要求。本品在生产过程中使用了乙酸乙酯及甲醇，这些溶剂有可能会残留到最终产品中，因此，本研究重点考察这几种溶剂的残留情况。参考中国药典2010年版二部附录“残留溶剂检查法”项下内容，采用气相色谱法同时测定本品中可能残留的有机溶剂[6-9]，本品采用直接进样方法，方法简便，重现性好，由于本品在水中微溶，因此本品采用二甲基亚砜作为溶剂。
1仪器与试剂
1.1仪器
电子分析天平，赛多利斯BP211D，Agilent7820A气相色谱仪，安捷伦色谱工作站；色谱柱：DB-624（30m×0.32mm，1.80μm）。
1.2试剂
甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、吡啶、甲苯、四氢呋喃、正己烷、乙腈、二甲基亚砜均为分析纯。盐酸替罗非班（南开允公药业有限公司，批号：100316、100429、100508）。
2方法与结果
2.1色谱条件的选择
依照残留溶剂测定法（中国药典2010年版二部附录ⅧP第三法），选择DB-624毛细管色谱柱，氢火焰离子化（FID）检测器，检测器温度300℃；进样口温度200℃；柱温40℃，维持20min，以20℃/min的速率升至220℃，维持10min。
2.2进样方式的选择
采用直接进样方法，分流比为10∶1，供试品溶液及对照品溶液各进样1μl。
2.3对照品溶液的配制
精密移取甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、吡啶、甲苯、四氢呋喃、正己烷、乙腈适量，加二甲基亚砜溶解，并稀释制成每毫升中分别含甲醇0.300mg、丙酮0.500mg、乙酸乙酯0.500mg、乙酸异丙酯0.500mg、吡啶0.020mg、甲苯0.089mg、四氢呋喃0.072mg、正己烷0.029mg与乙腈0.041mg的混合溶液，作为对照品溶液。
2.4供试品溶液的配制
精密称取本品，加二甲基亚砜溶解并稀释制成每毫升中约含0.1g的溶液，作为供试品溶液。
2.5系统适用性试验
移取对照品溶液，进样1μl，连续进样5次，记录色谱图，由图可知，各溶剂峰均能够分开，最小分离度为1.8（表1，图1）。
2.6检测限及定量限的考察
分别移取各对照品，逐步稀释，进样1μl，得到检测限及定量限结果（表2）。
2.7线性关系的考察
精密移取甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、吡啶、甲苯、四氢呋喃、正己烷、乙腈适量，加二甲基亚砜溶解，并稀释制成每毫升中分别含甲醇3mg、丙酮5mg、乙酸乙酯5mg、乙酸异丙酯5mg、吡啶0.2mg、甲苯0.89mg、四氢呋喃0.72mg、正己烷0.29mg与乙腈0.41mg的溶液，分别精密量取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml分别置入10ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，依法检查，以浓度C为横坐标，以峰面积A为纵坐标进行线性回归，结果见表3。
2.8精密度试验
取“2.3”项下对照品溶液，分别配制6份，依次进样，记录色谱图，量取峰面积。结果提示，本方法精密度良好，RSD值符合要求（表4）。
2.9回收率试验
精密移取甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、吡啶、甲苯、四氢呋喃、正己烷、乙腈适量，加入供试品溶液溶解，并稀释制成每毫升中分别含甲醇3mg、丙酮5mg、乙酸乙酯5mg、乙酸异丙酯5mg、吡啶0.2mg、甲苯0.89mg、四氢呋喃0.72mg、正己烷0.29mg与乙腈0.41mg的溶液，分别精密量取0.8、1.0、1.2ml分别置于10ml量瓶中，加供试品稀释至刻度，摇匀，作为回收率测定供试品溶液；同时配制对照品溶液，依法检查。结果测定的9种溶剂的平均回收率为95%～105%，各溶剂回收率的最大RSD值为7.2%，表明本方法的回收率良好。
2.10含量测定
取本品样品3批，分别加二甲基亚砜溶解并稀释制成每毫升中约含0.1g的溶液，作为供试品溶液；取“2.3”项下对照品溶液，供试品溶液和对照品溶液分别进样1μl，记录色谱图，供试品溶液中如有残留溶剂峰，量取峰面积，计算残留溶剂含量。结果提示，3批样品中均不含有上述残留溶剂（表5）。
3讨论
本品在水中微溶，采用二甲基亚砜作为溶剂，增加了本品的溶解度，提高了对残留溶剂检出的灵敏度。采用气相色谱法测定残留溶剂是中国药典检测残留溶剂最常用的方法。经过方法学考察，本方法专属性强，经过检测限的测定，说明本方法有较高的灵敏度，能够保证对低限度的溶剂进行准确的测定。通过线性试验及回收率试验的测定，进一步说明本品能够对残留溶剂进行准确定量。
[参考文献]
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