摘要:以患病豫杂-1号泡桐的叶片、叶柄、茎段为材料,通过在培养基中施用不同的激素,观察材料的长芽情况,筛选出最佳外植体及最佳激素组合。实验结果表明:患病豫杂-1号泡桐芽诱导的最佳外植体是茎段,相应的培养基及激素组合为MS培养基,NAA0.3mg/L,6-BA12mg/L。此方案下的芽诱导率为30.19%。
关键词:泡桐丛枝病外植体再生基质
引言
泡桐在我国种植历史悠久,商代以前已有种植,北宋《桐谱》一书全面记载了古代劳动人民在泡桐栽植利用方面的丰富经验,1949年后泡桐造林获得更大发展。其在我国生态环境改善和农业结构调整等方面都起着重要作用,然而,丛枝病的发生给泡桐生产造成了严重的损失。丛枝病一直是影响泡桐生产质量的较为普遍的病害,有的地区发病率高达80%~90%。发病时花变叶及枝变成扫帚状或鸟窝状。目前的防治措施主要是树干注药、修剪病枝、拔除病株等,这些都难以摆脱丛枝病对泡桐造林造成的遗憾。本次实验试图从筛选适宜的培养基和适宜的外植体入手,为泡桐丛枝病的防治奠定基础。
1材料与方法
1.1试验材料
1.1.1外植体以患病的豫杂-1号泡桐幼嫩的叶片、叶柄、茎段为材料。本次试验材料由河南农业大学泡桐生物研究所提供。
1.1.2MS培养基每配1L培养基,加琼脂条3.6克,蔗糖20克。均分别装到20个100ml的三角瓶内。
1.1.3激素所用激素为NAA和6-BA。激素浓度配比见表-1。
表-1激素浓度配比
NAA6-BA 0481216
0.1
0.3
0.5
0.7
0.9 A11A12A13A14A15
A21A22A23A24A25
A31A32A33A34A35
A41A42A43A44A45
A52A52A53A54A55
注:A11=NAA0.1mg/L,A21=NAA0.3mg/L,……
A12=NAA0.1mg/L+6-BA4mg/L,……A55=NAA0.9mg/L+6-BA16mg/L
1.2试验方法
试验以二因素为指标,先分析单个因素,后综合分析这两个因素。因素A为激素配比,有NAA0.1mg/L,NAA0.3mg/L……NAA0.9mg/L+6-BA16mg/L,共25种配方(见表-1)。因素B为外质体种类,有B1(叶子)、B2(叶柄)、B3(茎段)三种类别。共75个组合。试验为期60天。
2 结果与讨论
2.1不同激素对芽诱导的影响
不同激素对芽诱导的影响不同。统计各激素对各种外质体芽的诱导率并分别列于表-2、表-3、表-4。
表-2不同激素对叶片芽诱导
激素组合 A11 A12 A13 A14 A15 A21 A22 A23 A24 A25 A31 A32 A33 A34 A35 A41 A42 A43 A44 A45 A51 A52 A53 A54 A55
外质体数 93 80 82 102 81 96 89 107 87 62 74 83 83 84 80 81 88 82 83 93 82 93 74 97 84
生芽数 0 1 5 9 6 0 3 11 26 18 0 3 13 13 5 1 6 2 9 9 0 2 2 14 6
芽诱导率 0 1.25 6.10 8.87 7.41 0 3.37 10.28 29.89 29.03 0 3.61 15.66 15.48 6.25 1.23 6.82 2.44 10.84 9.68 0 2.15 2.70 14.43 7.14
表-3不同激素对叶柄芽诱导
激素组合 A11 A12 A13 A14 A15 A21 A22 A23 A24 A25 A31 A32 A33 A34 A35 A41 A42 A43 A44 A45 A51 A52 A53 A54 A55
外质体数 51 78 124 103 80 82 57 80 85 94 80 79 73 78 76 66 53 84 82 72 78 84 79 61 69
生芽数 0 6 5 8 1 1 5 13 9 10 0 3 2 9 0 0 7 13 4 2 0 5 7 3 0
芽诱导率 0 7.69 4.03 7.77 1.25 1.22 8.77 16.25 10.59 10.64 0 3.80 2.74 11.54 0 0 13.21 15.48 4.88 2.78 0 6.76 8.86 4.92 0
表-4不同激素对茎段芽诱导
激素组合 A11 A12 A13 A14 A15 A21 A22 A23 A24 A25 A31 A32 A33 A34 A35 A41 A42 A43 A44 A45 A51 A52 A53 A54 A55
外质体数 38 52 88 69 54 59 54 72 53 61 55 50 64 56 53 70 39 55 58 58 50 52 58 56 45
生芽数 1 7 4 6 4 0 4 12 16 9 0 5 6 4 2 0 9 5 2 1 0 4 6 7 1
芽诱导率 2.63 13.46 4.55 8.70 7.41 0 7.40 16.67 30.19 14.75 0 10 9.38 7.14 3.77 0 16.67 9.10 3.45 1.72 0 7.70 10.34 12.50 2.22
2.1.1不同激素对叶片芽诱导的影响