红花提取物对肾性高血压大鼠血清抗炎性细胞

　　摘要目的观察不同剂量的中药红花萃取物（HE）对肾性高血压大鼠血液抗性炎性细胞因子白介素-10（IL-10）的水平的影响。方法选取2月龄健康Wistar大鼠随机分为五组：假手术组（A组）、模型对照组（B组）、红花高剂量组（C组）、红花中剂量组（D组）和红花低剂量组（E组），采用改良的两肾一扎方法建立大鼠高血压模型。分组灌胃给药五周后，称重处死动物，抽取血液，分离血清,﹣70℃保存备用，采用ELISA法测定血清IL-10的浓度。结果各组大鼠血清IL-10的浓度分别为101.29±7.59pg/ml(A)，95.91±5.69pg/ml(B)，95.31±6.22pg/ml(C)，95.49±5.53pg/ml(D)和95.55±5.22pg/ml(E)，各组之间统计学处理均无明显差异（p>0.05）；结论肾性高血压大鼠血清抗炎性细胞因子IL-10水平变化不大，中药红花萃取物无明显升高抗炎性细胞因子IL-10的作用。
　　关键词：高血压；肾性；大鼠；IL-10；红花萃取物；
　　高血压病是临床最常见的疾病之一，亦是动脉粥样硬化、冠心病、脑血管疾病以及其他许多血管性疾病发生的最危险因素，近年来的研究表明炎性机制在高血压的发生、发展及转归中也扮演着极其重要的角色，特别是促炎性细胞因子与高血压的发生、发展存在密切的联系，促炎性细胞因子如肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）等不仅可引发高血压和导致高血压病人的胰岛素抵抗［1］，而且与高血压的其他并发症如动脉硬化、心室肥厚、心功能减退以及血栓形成等的发生、发展密切相关［2］，而IL-10被认为是体内最重要的抗炎细胞因子，对炎症反应的调控起非常重要的作用，既往的研究表明，而中药红花不仅具有降压作用［3］，并有改善循环、抗血小板聚集、降低促炎性细胞因子水平等多种功能［4,5］，但其对抗炎性细胞因子IL-10的影响鲜有报道，本研究采用动物模型，观察了红花萃取物对肾性高血压大鼠血液中的抗炎性细胞因子IL-10水平的影响，现报告如下。
　　1.实验材料与方法
　　1.1材料与试剂
　　2月龄健康Wistar大鼠50只,♀♂兼用，体重160-180g,由烟台绿叶制药有限公司动物实验室提供，普通饮食喂养。红花萃取物由烟台绿叶制药有限公司提供；IL-10ELISA法检测试剂盒（进口分装）购自北京邦定泰克生物技术有限公司。
　　1.2.方法
　　1.2.1肾性高血压模型建立取健康Wistar大鼠,术前禁食12h,自由饮水,测尾动脉压,用3%戊巴比妥钠(0.23ml/100g)行腹腔注射麻醉后,腹左侧备皮,于左肋弓下缘0.5cm、脊柱前0.5cm处行1.5～2.0cm纵切口,逐层分离皮下组织,于左肾后上方用自制的玻璃分针分离肾动脉,在左右肾动脉分支之间的腹主动脉下穿入2.0手术缝线,沿血管走行方向放置7号注射针头与腹主动脉一起结扎,然后小心拔出针头,腹腔滴入青霉素(40万U/ml)适量,逐层关腹、缝合，术后肌注青霉素10万U。假手术组不结扎腹主动脉,其余同手术组。术后正常饮食,定时观察体征。
　　1.2.2分组、给药与取材将50只大鼠随机分为假手术组（A组）10只，手术组40只，再将手术组大鼠随机分为四组：模型对照组（B组），红花高剂量组（C组）及红花中剂量组（D组），以及红花低剂量组（E组）各10只，五组大鼠按上述方法造模二周后，C组、D组及E组大鼠分别予以红花萃取物80mg/kg、40mg/kg、20mg/kg灌胃，每日一次，而A组和B组大鼠予以等量饮用水，给药总时程为五周。给药结束后，处死动物，腹主动脉取血，高速离心后分离血清，零下70℃保存备用。
　　2.检测方法与统计学处理
　　采用ELISA法测定血清IL-10的浓度，各项指标均用±S表示,两组间比较用ｔ检验，所有数据均输入SPSS10.0统计软件进行统计分析，p<0.05为统计学差别有显著性意义。
　　3.结果
　　实验结束后，各组大鼠血清IL-10浓度变化的情况（见表1）。
　　表1卡托普利及红花萃取物对大鼠血清IL-6、IL-10及TNF-α浓度的影响（±S）
　　
　　注：△与假手术组相比，p>0.05;﹡与模型对照组相比，p>0.05;
　　结果显示，各组之间相互比较，IL-10的血清浓度变化不大，统计学差异无显著性。
　　4.讨论
　　IL-10是最初是由Fiorentino在1989年发现的鼠辅助T细胞Th2亚型细胞分泌的一种细胞因子，能抑制巨噬细胞活化及继发的细胞免疫反应,对单核/巨噬细胞的细胞因子的合成和功能有广泛的抑制作用,具有抑制单核/巨噬细胞产生TNF-α、IL-6、白介素-1α（IL-1α）、白介素-1β（IL-1β）等促炎性细胞因子、抑制核因子-κB（NF-κB）和Ras等信号传导通路、上调体内细胞因子拮抗剂IL-1RA等多种作用［6］。体外研究表明，抗炎性细胞因子IL-10具有对抗促炎性细胞因子、抗细胞凋亡以及抗平滑肌细胞增殖等有利于高血压治疗的作用［7］，提高其循环中的浓度也是高血压抗炎干预的一个靶点，张永和等人在多发性创伤的研究中显示IL-10的循环水平于损伤后第1天开始升高,至第5天达到高峰,2周后仍高于正常对照组，其水平升高程度与促炎性细胞因子TNF-α、IL-6的水平呈正相关，监测其变化有利于创伤程度的判断具有显著的临床意义［8］。本研究显示在肾性高血压大鼠循环中IL-10的水平变化不大，其机制有待于进一步研究，可能与观察时间长（七周）有关。
　　红花为传统的中药之一，具有良好的活血通经、化瘀止痛的功能，其萃取物的主要水溶性成分为红花黄色素，是多种查耳酮类化合物的混合物，具有扩张血管、降低血压、改善血粘度、抗血小板聚集等多种功能［9］。细胞凋亡是高血压左室重构的重要机制之一，有研究显示其能够显著降低BAX、提高Bcl-2在心肌组织内的表达，可防止心肌细胞的凋亡，并可明显降低循环中的促炎性细胞因子TNF-α、IL-6的浓度［10］，这些特性对预防及延缓高血压的并发症的发生发展具有重要的作用，尽管IL-10是体内最重要的抗炎细胞因子，本研究显示在肾性高血压时，不同剂量的红花萃取物对IL-10循环的水平均无明显影响，显示了红花提取物可能主要是通过抑制促炎性机制的活性而在高血压的治疗中发挥重要的作用。
　　5.参考文献
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