脾肾两助颗粒又叫脾肾两助丸，此药可以健脾益肾，主要用于减轻肿瘤病人术后放、化疗副反应，提高机体免疫功能以及脾肾虚弱所引起的疾病，脾肾两助颗粒是我院用于治疗慢性溃疡性结肠炎(UC)取得较好疗效的中药复方制剂,为了给临床用药提供科学依据,我们对其进行了相关的药效学研究。现报道如下。
《安徽医药》主要报道国内外医药学研究进展，临床药学，药品监督管理及药品生产、经营等学术论文和重要信息。辟有综述与讲座、药学研究、药物与临床、药物分析、药品监督、医药工业、医药商情、医院药学、中药园地、微机应用等栏目。期刊面向药学、医护、药品监督工作者;药品生产经营科学技术、管理人员。是一份专业性、实用性较强的科技期刊。获奖情况：2005-2009年先后获得安徽省优秀科技期刊奖。
观察脾肾两助颗粒对小鼠溃疡性结肠炎模型的影响,为临床用药的有效性提供实验依据。方法 采用番泻叶致小鼠腹泻,观察脾肾两助颗粒对小鼠腹泻的影响;利用三硝基苯磺酸(TNBS)和50%乙醇局部灌肠相结合造成小鼠溃疡性结肠炎模型,观察脾肾两助颗粒对小鼠免疫球蛋白IgG、IgM的影响。结果 脾肾两助颗粒能明显减少番泻叶所致的小鼠腹泻次数,与对照组比较差异具有显著性意义(P<0.01);脾肾两助颗粒能降低小鼠IgG、IgM水平。结论 脾肾两助颗粒治疗溃疡性结肠炎疗效显著。
1 实验材料
1.1 动物 昆明种小鼠,(20±2)g,♂、♀兼用,普通级,由山西中医药研究院实验动物室提供,1999年引自中国医学科学院实验动物繁育所。动物符合GB-14922-94Ⅱ级标准,动物合格证号：晋动(证)字第A00-001号。
1.2 药物与试剂
脾肾两助颗粒以六君子汤加黄芪、补骨脂、郁金等组成,每克相当于原药材5 g,山西医科大学第二医院中药制剂室提供,批号020309。50%番泻叶煎液、50%乙醇、乙醚,山西医科大学第二医院中药制剂室提供。思密达,博福-益普生(天津)制药集团生产,批号H20000690;柳氮磺吡啶,山西三九同达药业有限公司生产,批号H14022874。脾肾两助颗粒、思密达、柳氮磺吡啶,用蒸馏水配制一定浓度溶液,灌胃备用。三硝基苯磺酸,美国Sigma公司生产,批号042K5002。IgG试剂盒,批号LoNoE110-100-7;IgM试剂盒,批号LoNoE110- 128-11,均由美国Bedlyl公司生产。
1.3 实验条件
室温(22±1)℃,相对湿度(50±5)%。
2 方法和结果
2.1 脾肾两助颗粒对番泻叶所致小鼠腹泻的影响教师职称论文发表
取小鼠50只,♂、♀各半,随机分为5组：空白对照组,脾肾两助颗粒小、中、大剂量组及思密达组,每组10只。用药组按剂量给药,每天2次,连续7 d;除空白对照组外,分别用脾肾两助颗粒0.45、0.9、1.8 g/(kg?d)及思密达1.35 g/(kg?d)灌胃。实验前动物禁食6 h,给药1 h后,空白对照组用同体积蒸馏水灌胃;各组小鼠分别用50%番泻叶煎液0.2 mL/10 g灌胃致泻,用漏斗把小鼠罩在钢丝网上,网下放上滤纸,连续观察3 h,记录小鼠排便次数及稀便腹泻情况(粪便每粒为1次,稀便每堆为1次)。所有数据用SAS8.2统计软件包处理,两组间行方差齐性检验,组间用方差分析,组内用重复测量的方差分析(下同)。结果见表1。 表1 脾肾两助颗粒对番泻叶所致小鼠腹泻的影响(略)注：与空白对照组比较,*P<0.01,**P<0.001,***P<0.0001。
2.2 脾肾两助颗粒对UC小鼠免疫球蛋白指标变化的影响
取小鼠60只,♂、♀各半,随机分为6组：空白对照组、模型对照组、柳氮磺吡啶组及脾肾两助颗粒小、中、大剂量组,每组10只,禁食12 h。用药组按剂量给药,空白对照组用同体积蒸馏水灌胃,每天2次,连续7 d。除空白对照组外,其他各组分别用脾肾两助颗粒0.45、0.9、1.8 g/(kg?d)及柳氮磺吡啶0.9 g/(kg?d)或等容积生理盐水灌胃,1 h后乙醚轻度麻醉小鼠,用直径2 mm的灌肠器从肛门处插入结肠约4 cm处,注入生理盐水或2%三硝基苯磺酸(+50%乙醇)0.1 mL,并保持小鼠水平状态约30 s, 7 d后再次灌入1%三硝基苯磺酸(+50%乙醇)0.1mL。第1次和末次给药30 min后,乙醚轻度麻醉小鼠, 取鼠尾静脉或眼眶静脉丛血20 μL,采用ELISA法测定免疫球蛋白IgG、IgM含量。结果见表2。表2 实验小鼠IgG、IgM指标变化(略)注：与同组治疗前比较,#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001;与空白对照组比较,**P<0.001;与模型对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01,★★★P<0.001。
3 讨论
现代医学认为,UC发病主要与免疫以及遗传有关,而遗传素质和免疫失调与中医脾肾关系密切。肾藏精,主生殖,先天禀赋差异主要归于肾,而肾特别是肾阳与神经内分泌密切相关;脾为气血生化之源,机体免疫功能与脾的功能状态相关。现代研究表明,通过长期健脾补肾,可以影响神经内分泌免疫系统,调节激素、神经递质、细胞因子的变化与基因表达,从而影响活性物质的释放,改善机体免疫失衡状态[1]。脾肾两助颗粒由黄芪、补骨脂、郁金加六君子汤等组成,全方健脾益气、滋补肝肾,标本兼治,不寒不燥,为治疗慢性泄泻之良方。
现代研究表明：UC的组织学改变显示有B淋巴细胞和T淋巴细胞混合浸润。正常肠组织的淋巴细胞以IgA分泌型B细胞为主,而UC肠组织中IgG分泌型B细胞明显增加。在肠道疾病中,当免疫复合物IgG大量增多或沉淀在肠道中时,造成局部肠黏膜损伤[2]。UC患者在肠黏膜受到炎症侵犯时,其肠黏膜具有多种抗原如结肠上皮细胞抗原、酵母菌抗原、O14型大肠杆菌酯多糖抗原等可能刺激机体免疫B细胞产生IgM。UC患者免疫学检查可见血清免疫球蛋白IgG和IgM在活动期增高[3]。实验给予小鼠脾肾两助颗粒治疗后,其血清IgG和IgM明显下降,提示脾肾两助颗粒可调节机体体液免疫功能,减轻肠道组织损伤。综上而言, 脾肾两助颗粒可以调节UC模型小鼠失衡的免疫水平,减轻自身免疫反应,减少特异性或非特异性炎症分子的释放,缓解肠道免疫破坏作用。
现代中药药理学研究表明,黄芪提取成分F3为免疫增强剂,F2有很强的免疫抑制作用,因此,黄芪具有免疫双向调节作用;六君子汤对肠肌运动具有明显的双向调节作用,对兴奋状态的肠肌运动有抑制能力,对抑制状态的肠肌运动有兴奋功能,能调节免疫功能;补骨脂有细胞毒样作用;郁金对特异性免疫和非特异性免疫均有明显的抑制作用[4]。因此,脾肾两助颗粒治疗溃疡性结肠炎疗效显著。
【参考文献】
1] 阮时宝,吴符火.久泻宁的药效学实验研究[J].中医药学刊,2005, 23(7)：1172-1174.
[2] 李琪佳,徐 敏,张雪怡,等.免疫复合物IgG及补体C30在溃疡性结肠炎免疫发病机制中的作用[J].中国综合临床,2001,17(8)：614.
[3] 王 青,许 琳.溃疡性结肠炎的实验室检查和活动性评估[J].世界华人消化杂志,2000,8(3)：336.
[4] 沈映君.中药药理学[M].北京：人民卫生出版社,2000.880,958,910, 646.
