吡喹酮是人工合成的吡嗪异喹啉衍生物，为一种高效、广谱的抗血吸虫和抗绦虫药，喹酮制剂主要是片剂和胶囊,但口服用药首过效应大,生物利用度低,使用受到一定限制。
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研究吡喹酮水凝胶栓剂经直肠给药后在家兔体内的药动学及相对生物利用度。方法 取家兔12只，随机分为口服给药组和直肠给药组二组，给药后采用HPLC法测定血药浓度。 结果 经3p97药动学程序处理吡喹酮水凝胶栓剂经直肠给药的药-时数据符合一房室开放药代动力学模型，其相对生物利用度为173.2%。 结论 吡喹酮水凝胶栓剂的生物利用度是口服给药的1.7倍，具有一定的开发价值。
温敏水凝胶是一种智能高分子材料，能随环境温度的变化发生可逆性的膨胀-收缩，高温收缩型水凝胶在温度低于低温临界溶解温度(lower critical solution temperature，LCST)时，凝胶在水中形成良好的水化状态，温度升高，凝胶脱水收缩[1-3]，利用此性质可以控制药物的释放。经查阅国内外有关文献,未见有吡喹酮水凝胶栓剂的报道，本文采用泊洛沙姆P407/P188[4-5]制备了吡喹酮水凝胶栓剂，并采用HPLC法[6]检测其经直肠给药后家兔体内的血药浓度、药动学和生物利用度。
1 仪器、试药与实验动物
1.1 仪器与试药
美国Agilent公司1100高效液相色谱仪，DAD检测器，色谱柱ZORBAx SB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)，BF―2000氮气吹干仪(上海八方世纪科技有限公司)。吡喹酮原料药(上海菱玉贸易有限公司，9917%，批号0410031);吡喹酮标准品(中国药品生物制品检定所);吡喹酮水凝胶栓剂(2%，本室研制);地西泮对照品 (中国药品生物制品检定所提供);泊洛沙姆(德国，BASF公司提供);乙腈、甲醇均为色谱纯;其他试剂均为分析纯。
1.2 实验动物
大白兔(由武汉大学医学院实验动物中心提供)，体质量(2.1±0.3) kg,雌雄各半。
2 实验方法及结果
2.1 色谱条件
色谱柱ZORBAxSB C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm) ，Agilent色谱工作站，DAD检测器; 流动相: 乙腈水(体积比70∶30);内标: 地西泮;检测波长:220 nm;灵敏度:0.02AUFS;流速:1.00 mL・min-1;纸速:0.25 cm・min-1。
2.2 标准溶液的制备
精密称取干燥至恒重的吡喹酮5.0 mg于100 mL量瓶中,加流动相溶解后用流动相稀释配成5 μg・mL-1的标准液。精密称取干燥至恒重的地西泮5.0 mg于100 mL量瓶中,加流动相溶解后用流动相稀释配成0.5 μg・mL-1的内标液。
2.3 血浆的处理
取空白血浆2份，各0.5 mL，置于10 mL具塞离心管中，其中1份加入适量吡喹酮标准液和20 μL内标液;各加入醋酸乙酯3 mL提取，振荡2 min，以3 000 r/min离心，取有机层经氮气吹干，残留物用100 μL流动相溶解，取20 μL进样。药物及内标物的保留时间分别为4.17和5.06 min,见图1。
2.4 标准曲线的制备
取空白血浆0.5 mL，分别置于6只10 mL具塞离心管中，加入不同量吡喹酮标准液和内标液20 μL，配成每1 mL含吡喹酮0.05、0.1、0.5、1、2、5、10 μg的溶液，按“2.3”项下，以吡喹酮与内标峰面积比值(A)对吡喹酮质量浓度(ρ)作线性回归,得标准曲线方程:A=-6.214 7+11.579 4ρ(r=0.997 3),最低检测浓度(S/N≥3)为0.05 μg・mL-1。
2.5 回收率测定
取空白血浆精密加入已知量的吡喹酮，然后按“23”项下操作，测得吡喹酮与内标峰面积比值，代入标准曲线求出各样品的浓度，将求得的浓度与已知加入的浓度相比，计算相对回收率，结果见表1。表1 回收率试验结果(略)
2.6 精密度测定
取空白血浆，精密加入低、中、高3种浓度的吡喹酮，按“2.3”项下操作，进行日内和日间精密度考察,日内各浓度测定5次，连续测定5天，计算日内、日间精密度结果见表2。表2 精密度试验结果(略)
2.7 血药浓度的测定
取雌、雄各半的健康家兔12只,禁食24 h,分为2组,每组6只。口服给药组以配制的2%ρ吡喹酮CMC-Na混悬液灌胃给药。直肠给药组以吡喹酮水凝胶栓剂经直肠给药,封闭肛门以免溢出。两组给药剂量均为40 mg/kg。给药后,于0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10 h自耳缘静脉采血2 mL。血液用肝素抗凝,离心10 min(3500 r/min)分离血浆。然后按“2.3”项下操作制备血样,进样20 μL进行含量测定,药时曲线见图2。
2.8 药动学分析
利用3p97药代统计数据包对药时曲线进行不同的代谢模型拟合,直肠给药和口服给药均与一房室模型较为接近。分别对两组家兔的药代动力学参数进行计算,结果见表3。表3 药物动力学参数(略)
3 讨 论
3.1 将吡喹酮作为治疗药物，以高温收缩型水凝胶为载体，制备得吡喹酮水凝胶栓剂。其具有以下优点：在体外呈凝胶，在体温下很快胶凝;易于从肛门给药而无异物感，从而提高患者用药顺应性;对直肠有生物黏附性，给药约数分钟后即凝固成固体，不易遗漏;无首过效应,可大大提高其生物利用度;同时可减少对胃肠道刺激,降低不良反应的发生率。
3.2 从表3可知，直肠给药组的吸收速率常数Ka为2.598 h-1，其最高血药浓度Cmax为3.1073 μg・mL-1，达峰时间Tmax为3.078 h;口服给药组吸收速率常数Ka为1.278 h-1，其最高血药浓度Cmax为1.7258 μg・mL-1，达峰时间Tmax为2.146 h。这表明吡喹酮水凝胶栓剂的吸收优于吡喹酮溶液;由于吡喹酮水凝胶栓剂处方中加入生物黏附剂，当直肠给药时栓剂不向前滑动，药物不会经直肠上端静脉吸收入肝门静脉而被破坏,而经直肠下端静脉充分吸收后直接进入大循环,减少了药物的首过作用而提高了生物利用度[7]，其相对生物利用度为173.2%，是口服给药组的1.7倍。
参考文献:
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