摘 要：笔者以瓜果腐霉菌、立枯丝核菌为指示病菌，通过多种不同因素筛选堆肥，对指示病菌具有抑制生长作用的微生物研究，希望为蔬菜生产中病害防治及堆肥的多功能应用提供参考性意见。
关键词：堆肥;蔬菜土传病;生防菌
1 材料与方法
1.1 材料农作物：黄瓜(由市场购买所得)，未经过特殊处理。材料：各种粪便、经过保湿处理的菜园土壤。培养基：细菌用牛肉膏蛋白胨培养基;放线菌用高氏一号培养基;真菌分离用马丁氏培养基;病原菌和拮抗菌的对峙培养用。抗菌谱指示病原菌：瓜果腐霉菌;稻瘟菌;小麦赤霉菌;立枯丝核菌;辣椒疫霉菌;西瓜枯萎菌;番茄早疫菌;油菜菌核病菌 [1]。
1.2 方法在拮抗菌的筛选方面及抗菌谱的测定采用平板对峙培养法;重寄生菌的筛选参照对峙培养法。盆栽实验：首先将从堆肥中筛选得到的放线菌接入高氏一号液体培养基中，温度为 27 ℃ , 摇床 (150 r/min) 培养 6 d 后。黄瓜种子用 0.3% 次氯酸钠溶液处理 25 min 后，再由无菌水冲洗 5 次，在土壤中，加 0.15% 的有机肥料，采用间歇湿热灭菌法灭菌 5 次，间歇时间为 24 h，每次灭菌 50 min。实验具体处理方式：所备好的无菌土壤严密封闭;所备好的无菌土壤只适用接种瓜果腐霉病菌;无菌土壤只适用接种立枯丝核病菌;无菌土壤同时接种瓜果腐霉病菌与拮抗菌;无菌土壤同时接种立枯丝核病菌与拮抗菌。拮抗菌接种量为 20mL，A10 培养液 (1mL 含 2×107 cfu);病原菌接种量为(1 土 100)mg 菌丝。实验进行处理 5 次，每盆播 20 粒黄瓜种子， 12 d 后记录每盆中的健康种子所成长的苗数，并且计算对成苗率 [2]。
2 结果
2.1 堆肥中生防菌的筛选经过 12 d 培养后，将所培植的对病菌具有抑制生长作用的菌株选出 30 株，其中，拮抗菌占绝大多数，重寄生真菌数量较少，分别为 25 株、5 株。在 25 株拮抗菌株中，瓜果腐霉病菌对 18 株无效，具有拮抗作用;立枯丝核病菌对 17 株无效，具有拮抗作用。其中，放线菌(代号 A1、A3、A5、A8、 A9、A10、A13、A14 及 细 菌 T12、 T15)对瓜果腐霉病菌和立枯丝核病菌同时具有效果，具有拮抗作用，其中放线菌 A10 的拮抗效果最为显著，对瓜果腐霉病菌的拮抗带宽度与拮抗菌菌落直径为 7.45 mm;对立枯丝核病菌的 R2/R1 为 9.74。另一方面，在剩余的 5 株重寄生菌中，发现木霉 A11 的寄生能力最为显著。根据培养大家发现，型号为 A11 木霉菌株能够与分别与立枯丝核菌、瓜果腐霉菌培养 48 h 后在平板上菌丝交接在一起，并且木霉菌丝能够覆盖病原菌菌丝，然后在原有病原菌菌丝产生一种新的菌丝，生长迅速，完全不受病原菌的影响。计算公式为：病情指数 = ∑(各级病株数 × 相对应级别数)/(调查总株数 × 最高级值)×100。防治效果(%)=[ 对照病情指数 ( 或病株率 )- 处理病情指数 ( 或病株率 )]/ 对照病情指数(或病株率)×100%。
2.2 拮抗菌 A10 抗菌谱的测定及对黄瓜猝倒病、立枯病的防效部分放线菌对瓜果腐霉菌的拮抗效果见表 1。通过实验结果可发现：放线菌 A10 拮抗能力强大，不仅对瓜果腐霉菌和立枯丝核菌对其无效同时，对椒疫霉菌、番茄早疫病菌等病菌都有较为显著的抑制效果，抗菌层面巨大。在后续中，通过盆栽实验结果显示：对其 15 d 的培养后，无菌土壤在接种 A10 对疾病具有很强的防效性，在猝倒病和立枯病的防效分别达到 65% 和 50%，效果良好。
3 讨论
农民利用各种粪便或是污泥所制作堆肥虽然成分复杂，但是对于蔬菜中的猝倒病、立枯病具有很强的防效性。在堆肥过程中，通过长时间发酵，它们之间互相融合，将所产的优质微生物集中起来，可以说是继土壤之后又一个微生物资源库 [3]。
4 结语
进入 21 世纪后，堆肥不再局限于农村，学者们对其强大的抑菌防病能力震惊不已，并且研究效果已初见成效，随着人们节能环保意识的不断提升，通过废弃物资源而所制造的堆肥符合现代社会发展的方向。因此，目前人们对充堆肥在作物栽培的功效还有许多需要去探索的问题，促使堆肥作用变的更为合理、科学、有针对性。
参考文献
[1] 孙睿 . 土传病害现状及防治对策 [J]. 吉林蔬菜 ,2012(6):43-44.
[2] 张俊奇.设施蔬菜土传病 害 综 合 防 控 措 施 [J]. 长 江 蔬菜 ,2012(10):69-70.
《堆肥中蔬菜土传病害生防菌的筛选及评价》来源：《食品安全导刊》，作者：王薇。
