摘要：采用菌落直径法测定8种杀菌剂对山茶刺盘孢(Colletotrichum camelliae Massee)的毒力并进行田间药效试验。结果表明，山茶刺盘孢对嘧菌酯、咪鲜胺、多菌灵、三唑酮、苯醚甲环唑和甲基托布津高度敏感，其抑制中浓度(EC50)为0.092 4～2.163 3 μg/mL;对百菌清和代森锰锌为中度敏感，其EC50分别为5.115 0 μg/mL和11.331 5 μg/mL。田间药效试验结果表明，45%咪酰胺EW(375 g/hm2)的防效最高，达到91.32%;其次为25%嘧菌酯SC(150 g/hm2)和80%多菌灵WP(675 g/hm2)，其防效分别达到86.63%和80.55%;80%甲基托布津WP(500 g/hm2)的防效最低，为63.45%。
关键词：农业类核心论文发表,茶树,山茶刺盘孢(Colletotrichum camelliae Massee),毒力测定,防治效果
DOI：10.14088/j.cnki.ISSN0439-8114.2015.05.018
Abstract：The colony diameter law was used to test toxicities of 8 fungicides to Colletotrichum camelliae. The field trials were conducted to determine control effect of fungicides in Xinyang district. The results showed that Colletotrichum camelliae was highly sensitive to Azoxystrobin， Prochloraz， Carbendazim， Difenoconazole， Triadimefon and Thiophanate-methyl with the EC50 value ranging from 0.092 4 to 2.163 3 μg/mL. Colletotrichum camelliae was morderately sensitive to Chlorothalonil and Mancozeb with EC50 value of 5.115 0 and 11.331 5 μg/mL， respectively. The field efficacy showed that the Prochloraz 45% EC 375 g/hm2 was the best with the value of 91.32% control effect. The followings were Azoxystrobin SC 150 g/hm2 and Carbendazim WP 675 g/hm2 with the value of 86.63% and 80.55% control effect. Thiophanate-methyl WP 500 g/hm2 had the lowest control effect with the value of 63.45%.
Key words： tea plant; Colletotrichum camelliae; toxicity test; control effect
茶树云纹叶枯病是由山茶刺盘孢(Colletotrichum camelliae Massee)侵染引起的一种广泛发生的病害[1]。该病在不同的季节均有发生，以老叶发病较重[2]。茶树云纹叶枯病也是河南省茶园发生最普遍、危害最严重的病害。特别是秋季人工修剪后的茶园，常使茶树叶片大量脱落，严重影响茶叶的产量和品质[3]。茶叶是河南省的主要经济作物之一，信阳是其主产地，种植面积14万hm2，产量占全省茶叶总产量的90%，约占全国茶叶总产量的2%[4，5]。
探求生产上更直接、简便、经济、高效的防治药剂和方法措施，对于茶树云纹叶枯病的防治具有重要意义。喷洒化学药剂仍是目前防治茶树云纹叶枯病最直接、最简便的方法，同时也是最有效的防治方法。本研究采用菌落直径法，在室内测定8种杀菌剂对茶树云纹叶枯病菌(山茶刺盘孢)的毒力，并根据室内毒力测定结果，选择对茶树云纹叶枯病菌毒力强的杀菌剂进行田间防效试验，旨在为茶树云纹叶枯病的化学防治提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试菌株 山茶刺盘孢菌株(编号ERC4-9-6)于2012年采自河南省信阳市平桥区发病的茶树叶片，常规组织分离，置常规PDA平板上纯化后，于25 ℃恒温培养箱中培养保存。
1.1.2 供试药剂 25%嘧菌酯SC，先正达(中国) 投资有限公司生产;45%咪鲜胺EW，江苏瑞德邦化工科技有限公司生产，15%三唑酮WP，江苏建农农药化工有限公司生产;25%苯醚甲环唑EC，河南信阳富邦化工股份有限公司生产;70%甲基托布津WP和80%多菌灵WP，河北冠龙农化有限公司生产;70%代森锰锌WP，山东金正农药有限公司生产;50%百菌清WG，百农思达(北京)农用化学品有限公司生产。
1.2 试验方法
1.2.1 药剂质量浓度梯度的设置 根据预试验的结果，嘧菌酯、咪鲜胺和多菌灵分别设1.00、0.50、0.25、0.10、0.05 μg/mL 5个浓度梯度;三唑酮、苯醚甲环唑和甲基托布津分别设5.00、2.50、1.25、0.50、0.25、0.10 μg/mL 6个浓度梯度;代森锰锌和百菌清分别设20.00、10.00、5.00、2.50、1.25、0.50、0.10 μg/mL 7个浓度梯度。 1.2.2 含药培养基的制备 用移液器量取不同质量浓度供试药剂溶液，加入提前熔化好的 PDA 培养基，混匀后倒入培养皿中。用直径5 mm打孔器从菌落边缘切取菌块，移接于含药不同的PDA平板中央。以不含药的培养基为对照，各处理重复3次，以上操作在无菌操作台上进行。置于25 ℃恒温培养箱中培养5 d 后观测各处理菌落生长情况，十字交叉法测量菌落直径[6]，计算抑菌率。
以供试药剂浓度的对数值x为自变量，以抑菌率几率转换值y为因变量，求出各药剂的毒力回归方程，计算各药剂对菌株的抑制中浓度(EC50)[7]。EC50<5 μg/mL为高度敏感;5 μg/mL≤EC50<20 μg/mL为中度敏感;EC50≥20 μg/mL为不敏感。
1.2.3 田间药效试验 依据室内毒力测定结果，选择对茶树云纹叶枯病菌毒力较强6种药剂进行田间药效试验。在信阳市�负忧�车云山茶场进行试验，6月下旬和7月下旬各喷药1次。采用工农-18型背负式手动喷雾器进行喷雾，药液均采用2次稀释法配制，喷施药液量750 L/hm2。试验设45%咪酰胺EW为375 g/hm2、25%嘧菌酯SC为 150 g/hm2、80%多菌灵WP为675 g/hm2，15% 三唑酮为WP 60 g/hm2、25%苯醚甲环唑EC为 125 g/hm2、80%甲基托布津WP为 500 g/hm2、清水空白对照，共计7个处理。各处理间随机排列，重复3次，各处理区面积为30 m2。防效调查：每个小区定点选取5株，每株随机检查中上部植株叶片20张，在施药前和药后14 d，分级调查病叶数、病斑面积，计算病叶率、病指及防效。云纹叶枯病病情指标参照高旭丽[8]方法，病情指数及防治效果计算公式如下：
2 结果与分析
2.1 8种杀菌剂对山茶刺盘孢的毒力
8种杀菌剂对山茶刺盘孢的毒力回归方程、相关系数(r)、抑制中浓度(EC50)和95%置信限如表1所示。由表1可知，山茶刺盘孢对测定的8种药剂均表现敏感，其EC50在0.092 4～11.331 5 μg/mL之间。其中嘧菌酯、咪鲜胺、多菌灵、苯醚甲环唑、三唑酮和甲基托布津的EC50均小于5.0 μg/mL，表现为高度敏感。尤其是嘧菌酯、咪酰胺和多菌灵的敏感性最强，其EC50均小于0.5 μg/mL。百菌清和代森锰锌为中度敏感(5 μg/mL≤EC50<20 μg/mL)。
2.2 田间药效试验
选择对山茶刺盘孢高度敏感的6种药剂进行田间药效试验，结果见表2。从表2可知，6种药剂对茶树云纹叶枯病均有一定的防效，但不同处理间存在差异。以45%咪酰胺EW的防效最好，达到91.32%;其次为20%嘧菌酯SC和80%多菌灵WP，其防效分别达到86.63%和80.55%。以上3种药剂的防效都达到80%以上，其中20%嘧菌酯SC和80%多菌灵WP防效差异不显著，但后者与45%咪酰胺EW防效差异显著。15%三唑酮WP和25%苯醚甲环唑EC的防效分别为75.79%和73.85%，均超过70%，也有较好的防效。80%甲基托布津WP防效最低，为63.45%，显著低于其他5种药剂。
3 小结与讨论
河南信阳地区的山茶刺盘孢(茶树云纹叶枯病菌)对嘧菌酯、咪酰胺、多菌灵、三唑酮、苯醚甲环唑、甲基托布津表现高度敏感;对百菌清和代森锰锌表现中度敏感。其中嘧菌酯、咪酰胺和多菌灵的抑制中浓度(EC50)均小于0.5 μg/mL，表现极强的敏感性;选择其中表现高度敏感的6种药剂进行田间药效试验，结果表明6种药剂对茶树云纹叶枯病均有一定防效。其中咪酰胺的防效最高，为91.32%，可考虑做为河南目前及今后防治茶树云纹叶枯病的特效药剂。嘧菌酯和多菌灵的田间防效较为理想，均达80%以上，也可做为防治该病的常规药剂。三唑酮是一种内吸性较强的三唑类杀菌剂，持效期长。苯醚甲环唑属于保护和治疗性杀菌剂。两者的防效均在70%以上，也可作为防治茶树云纹叶枯病的轮换药剂使用。甲基托布津防效不理想，并显著低于其他5种药剂，其原因可能与其产品剂型、质量及施药浓度等有关，也可能是信阳地区在云纹叶枯病防治中长期、单一施用甲基托布津(调查中发现)，使病菌产生了一定程度上的抗药性。甲基托布津和多菌灵同为苯并咪唑类杀菌剂，其作用机理都是干扰真菌的细胞分裂[9，10]，两者可产生交互抗性[11]，这在茶树云纹叶枯病的防治上应当引起足够的重视。
参考文献：
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